產(chǎn)品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠細(xì)胞核蛋白、組織勻漿中的 DNMT1 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于 DNA 甲基化維持、表觀遺傳調(diào)控、基因沉默、腫瘤及發(fā)育表觀遺傳研究。
產(chǎn)品名稱:大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)elisa試劑盒
英文名稱:DNMT1 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號:CS-6201E
檢測原理:
大鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 DNMT1 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,DNMT1 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 DNMT1 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實驗步驟?:

1.試劑準(zhǔn)備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品按說明書進行梯度稀釋,配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。
2.實驗流程
加樣:設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品,37℃孵育。
加酶標(biāo)抗體:除空白孔外,每孔加入酶標(biāo)抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。
洗滌:棄去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復(fù)洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。
顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內(nèi)呈現(xiàn)藍色。
終止:每孔加入終止液,混勻后顏色由藍色轉(zhuǎn)為黃色。
檢測:在 450nm 波長下測定各孔 OD 值,15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。
3.關(guān)鍵提示
實驗全程嚴(yán)格控溫,孵育時使用封板膜避免蒸發(fā)。
洗滌需充分,否則易造成高背景、結(jié)果偏差。
顯色液需避光,終止順序與加樣順序保持一致,確保充分混勻。